摘要:

摘要:为了探究KLHL10基因在三角帆蚌性别分化中的作用，利用RACE （Rapid-amplification of cDNA ends）克隆了其cDNA全长，使用实时荧光定量分析比较其在6个不同组织（性腺、鳃、肝胰腺、斧足、闭壳肌、外套膜）、早期发育阶段（1~8月龄）性腺及12、24、36月龄雌雄性腺中表达水平的差异，运用RNA干扰（RNAi）对其功能进行初步探究。结果显示KLHL10基因cDNA全长为2 361 bp，其中5'非编码区长93 bp，3'非编码区长447 bp，开放阅读框（ORF区）长1 821 bp，编码606个氨基酸；qRT-PCR结果显示KLHL10基因在精巢中高表达；早期发育阶段在6月龄时表达量最高；12、24、36月龄的表达结果显示，KLHL10基因在精巢中的表达量均高于同时期在卵巢中的表达量（P<0.05）。同时，设计KLHL10基因的3条dsRNA干扰链，结果显示RNA干扰能有效减少KLHL10基因在性腺组织的表达量。根据以上结果推测KLHL10基因在三角帆蚌中是雄性相关基因，其可能参与三角帆蚌的性别分化与精巢发育。

摘要:八聚体结合转录因子4（octamer-binding transcription factor 4，Oct4）在干细胞多能性维持、胚胎早期发育和体细胞重编程等过程中具有重要作用，构建团头鲂oct4基因真核表达载体可为进一步研究该基因的功能提供实用工具。通过PCR方法从含有团头鲂oct4基因开放阅读框序列的载体pCS2+Maoct4中获得基因编码片段，连入真核表达载体pCVpr，构建重组的融合表达载体pCMV-Maoct4-Red；经酶切和测序鉴定后，采用脂质体法将该载体转染HepG2细胞，观察到细胞中红色荧光主要定位于细胞核，并采用Western blot方法分析融合蛋白的正确表达。成功构建了团头鲂oct4基因荧光真核表达载体pCMV-Maoct4-Red，该载体可用于真核细胞的核定位标记，为后续研究鱼类oct4基因的作用机制奠定了基础。

摘要:采用实时荧光定量、生物信息学、双荧光素酶报告和体内miRNA抑制的方法，探究miR-192在尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）应答碳酸盐碱度胁迫中的作用。结果如下：（1）实时荧光定量PCR实验表明，在急性碱度胁迫（6 g/L NaHCO₃）尼罗罗非鱼6 h后，鳃组织中miR-192的表达显著下调，溶质转运蛋白基因（solute carriers16A7，SLC16A7）表达显著上调（P<0.05）；（2）借助生物信息分析预测到SLC16A7可能是miR-192的靶基因；（3）利用双荧光素酶报告实验发现miR-192会与SLC16A7的3'UTR结合；（4）体内对miR-192抑制后，SLC16A7的表达显著上调（P<0.05）。证实了miR-192参与了尼罗罗非鱼应答碱度胁迫中的调控过程，SLC16A7是miR-192的直接靶基因，为探明miRNAs调控尼罗罗非鱼应答碱度胁迫的分子机制提供了一定的依据。

摘要:为了解江苏省湖泊大银鱼（Protosalanx hyalocranius）种群遗传多样性及遗传结构，基于PCR扩增与测序技术对太湖、高邮湖、洪泽湖和骆马湖等4个群体共160尾大银鱼的线粒体Cytb基因序列进行分析。结果显示，160条Cytb基因序列共发现25个变异位点，其中单一信息位点11个，简约信息位点14个。4个群体中共检测到23个单倍型，单倍型和核苷酸多样性分别为0.878±0.014和0.002 1±0.000 1，呈现出高单倍型多样性和低核苷酸多样性模式。4个群体中，高邮湖群体的单倍型多样性最高（0.871±0.031），太湖群体的核苷酸多样性最高（0.002 9±0.000 1）。洪泽湖群体的单倍型和核苷酸多样性均最低，分别为0.755±0.455和0.001 3±0.000 1。分子方差分析结果显示，大银鱼群体间的遗传变异占15.13%，群体内的遗传变异占84.87%，遗传变异主要发生在群体内。遗传分化指数F_st值统计表明：高邮湖、洪泽湖和骆马湖群体之间无显著性差异，但均与太湖群体存在显著性差异，应将太湖群体与其他3个群体作为不同的进化单元进行管理和保护。核苷酸不配对分布和中性检验结果均显示大银鱼经历了近期的群体扩张事件，推测扩张时间在10.3万~4.1万年前，属于更新世晚期。虽然江苏省4个湖泊大银鱼种群的遗传多样性较高，但其资源量已经呈现出明显衰退迹象，应加强相应的渔业管理和保护措施，合理开发和利用大银鱼资源，做到可持续发展。

摘要:为探究不同性别尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）对持续性高温生境的响应，持续监测36℃实验组和28℃对照组的雌鱼和雄鱼的形态学特征变化，并取处理70 d的罗非鱼脑、背部肌肉和鳃组织进行TUNEL染色法分析，选取该实验组和常温对照组个体的背部肌肉进行转录组测序。结果显示：高温处理组的生长发育速度明显迟缓于对照组，雄鱼生长发育比雌鱼快；TUNEL染色法显示在背部肌肉组织中凋亡信号最强，而在其他组织中信号较弱；在高温处理后的雌鱼和雄鱼中分别鉴定出3 405个和4 645个差异表达基因，上调基因均多于下调基因。对这些差异表达基因的KEGG通路聚类分析发现，雌鱼主要涉及细胞周期、嘌呤代谢和DNA复制等通路，雄鱼在心肌细胞的肾上腺素信号传导、心肌收缩和紧密连接等通路显著富集。这些结果为研究不同性别罗非鱼对高温环境的适应机制提供了分子生物学的基础信息。

摘要:研究低盐度对澳洲龙纹斑（Maccullochella peelii peelii）生长、血液生化、非特异性免疫能力的影响。将澳洲龙纹斑盐度驯化后，分别饲养于盐度为0、3、6、9的4组水体中60 d。结果表明，鱼体末体质量随盐度升高显著降低（P<0.05），饲料系数在盐度0组达到最优（1.11±0.11），成活率在盐度3组最高（98.33%±2.89%）。血液生化结果显示：随着盐度上升，肌酐含量呈逐渐降低趋势；尿素氮含量随盐度升高而上升，且在盐度9组[（7.00±0.26）mmol/L]显著高于0组（P<0.05）；其他指标均无显著性差异。非特异性免疫酶活力受盐度影响明显，其中碱性磷酸酶和溶菌酶活性均在盐度3组最高，超氧化物歧化酶活性在盐度6组最高，并显著高于其他组；盐度0组和6组的过氧化氢酶活力显著高于其他两组。综上，澳洲龙纹斑适宜在盐度为3的条件下养殖。

摘要:对星康吉鳗（Conger myriaster）卵巢发育过程中的个体形态学和卵母细胞特征变化，以及卵巢、肝脏、肌肉中营养成分的变化情况进行研究。结果表明：星康吉鳗卵巢发育分为5个时期，即卵母细胞单层滤泡期、卵母细胞出现脂肪泡期、卵母细胞卵黄充满期（早期、中期、末期）、卵母细胞核极化期和卵母细胞成熟期。卵母细胞直径、细胞核直径、脂肪泡直径和卵黄球直径随着卵母细胞的发育逐渐增长。卵母细胞中脂肪泡的初始发生位点在细胞核周围，并且发生时间上脂肪泡先于卵黄球，随着卵母细胞发育，脂肪泡呈环状分布并逐渐向细胞膜方向延伸；卵母细胞中卵黄球的初始发生位点在细胞膜周边的细胞质层，随着卵母细胞发育，卵黄球呈环状分布并向细胞核方向延伸。发育过程中星康吉鳗性体指数、肝体指数、眼径指数、肛长指数之间均呈正相关性；消化道指数与性体指数、肝体指数、眼径指数、肛长指数分别呈负相关性。营养成分变化表明，星康吉鳗主要储存脂肪的位置在肌肉，脂肪的转运在星康吉鳗的卵巢发育中起到了重要作用。研究结果可为星康吉鳗全人工繁殖提供参考。

摘要:采用实验生态学的方法对拉萨裂腹鱼（Schizothorax waltoni Regan）0~90日龄的异速生长模式进行研究。结果显示：拉萨裂腹鱼仔、稚鱼全长由慢速生长到快速生长的转折点为28日龄；其多数外部器官均具有异速生长特点，头部和尾部的生长快于躯干部，头长、肛前长、肛后长分别在24～25日龄、36～37日龄、37～38日龄出现生长拐点，头高和体高分别在40～41日龄、49～50日龄出现生长拐点；眼径在18～19日龄较早出现生长拐点，促使眼睛充分发育，以提高早期仔鱼在开口期摄食外源食物的能力；吻长在42～43日龄出现生长拐点，促进了口的充分发育，以适应不同阶段的饵料环境；胸鳍、背鳍、臀鳍、腹鳍和尾鳍分别在18～19日龄、39～40日龄、43～44日龄、46～47日龄、37～38日龄出现生长拐点，其中臀鳍和腹鳍长在拐点前后相对全长均呈现正异速生长，但是拐点后生长指数明显降低，各鳍在仔鱼早期的快速生长使拉萨裂腹鱼仔鱼的游泳能力得到大幅提高。拉萨裂腹鱼仔、稚鱼的异速生长模式，保证了各重要功能器官的充分发育，有效地保障了其开始摄取外源性营养后的生存能力，同时对早期野生资源保护和苗种生产有重要的指导意义。

摘要:基于坛紫菜（Pyropia haitanensis）转录组序列信息进行EST-SSR标记的开发，并利用多态性SSR标记构建DNA指纹图谱用于坛紫菜新品系SW-81的种质鉴定。结果显示：转录组数据中共检测出9 033个微卫星位点，其中三核苷酸重复类型为绝对优势基元，占比高达95%；经Primer 5.0软件对微卫星位点进行引物设计，并从中随机合成187对微卫星引物进行有效性分析，最终获得92对有效引物，其中42对为多态性EST-SSR标记，多态扩增率约为22.46%；利用开发的多态性EST-SSR标记构建了适用于5个坛紫菜品系的DNA指纹图谱，为新品系SW-81的种质鉴定提供有效的分子检测手段。上述结果表明：坛紫菜基因组中有着丰富的微卫星位点，且同一位点的基因序列在不同品系间存在变异，表现为扩增产物的多态性。基于EST-SSR标记的多态性分析可为坛紫菜种质资源的管理与鉴定提供有效的分子检测手段。

摘要:为了探究饲料中添加柠檬酸对大口黑鲈（Micropterus salmoides）生长、营养物质利用和氮（N）、磷（P）排放的影响，分别配制磷酸二氢钙（MCP）添加量为5、10（低磷饲料）、15 g/kg （对照饲料）的3组饲料（P5，P10，P15），在低磷饲料P5和P10中分别添加10 g/kg的柠檬酸，共5组实验饲料。投喂初始体质量为（16.0±0.16） g的大口黑鲈60 d。结果显示，随着MCP添加量的增加，大口黑鲈增重率、全鱼磷含量、粗蛋白沉积率、磷消化率、椎骨磷和血浆磷含量均显著增加（P<0.05），N排放量和全鱼粗脂肪含量显著下降（P<0.05），且均在P15组达到最佳水平。在P5饲料中添加柠檬酸，显著提高了鱼体增重率（+5.6%）和血浆磷含量，降低了饲料系数（-0.05）和N排放量（P<0.05），达到了和P10组基本一致的水平（P>0.05）；在P10饲料中添加柠檬酸，在数值上改善了生长性能（P>0.05），达到了和P15组基本一致的水平（P>0.05）。此外，在P5和P10饲料中补充柠檬酸，均显著提高了磷消化率，降低了P排放量（P<0.05）。综上所述，在低磷饲料中添加10 g/kg的柠檬酸可改善大口黑鲈生长、提高饲料和磷的利用率。

摘要:测定蜕壳周期内中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）幼蟹的鳃和外壳中的钙含量，并结合石蜡切片及电子显微镜技术，观察不同蜕壳时期鳃和外壳的组织结构。钙含量测定结果表明，鳃和外壳中的钙含量均在蜕壳期最低。显微观察结果显示，在蜕壳期，鳃叶末端的内外角质层分离，边缘管的空腔还未完全恢复，到蜕壳后期，边缘管空腔恢复正常形态；超微观察结果显示，在蜕壳期，鳃腔中的内容物较少，染色较浅，线粒体和微绒毛数量较多。蜕壳后期的鳃腔中的内容物增加，染色加深，线粒体和微绒毛数量多；外壳在蜕壳期时最薄，且只有上表皮和外表皮两层结构，到蜕壳后期，内表皮才逐渐形成。综上所述，中华绒螯蟹的钙含量和组织结构与蜕壳过程密切相关。

摘要:于2019年5—11月对4个河蟹淡水养殖实验池塘（T1、T2、T3和T4）水质及河道补给水源水质进行监测，基于氮磷负荷及尾水排放标准，采用2种模型对养殖容量和最佳养殖密度进行估算。结果显示：整个养殖周期内实验蟹塘TN均满足地表Ⅲ类水质标准，TP在养殖前期超标，末期优于Ⅲ类水质标准；以磷排放标准估算，T1、T2、T3和T4在1个养殖周期内的养殖容量分别为4 835、3 894、5 035和4 546 kg，养殖密度分别为12 012、12 249、12 154和16 770只/hm²，4个池塘均可大量增养；以氮排放标准估算，T1、T2、T3和T4在1个养殖周期内的养殖容量分别为3 786、2 999、3 948和3 401 kg，养殖密度分别为9 406、9 432、9 530和12 547只/hm²，T1、T2、T3均可增养50%以上，T4还可增养19.75%。结合4个实验池塘实际养殖状况，该养殖实验池塘河蟹养殖容量为2 006~2 598 kg/hm²，养殖密度为10 229~13 296只/hm²较为适宜；相较于磷排放标准，基于氮排放标准估算的养殖容量偏低，这可能与养殖池塘补给水源水质氮含量超标有关。

摘要:为了解养殖池塘沉积物中重金属分布概况评估其生态风险，2018年采集上海市范围内17个鱼虾蟹养殖池塘沉积物样品，检测样品中重金属（Cu、Zn、Pb、Cd、Cr、Hg、As）含量并进行多元统计分析以探究其分布和来源特点，利用3种不同评价方法评估其重金属生态风险。研究结果表明，池塘表层沉积物中Zn、Cr、Cu、Pb、As、Cd和Hg年均含量分别为（58.36±23.41） mg/kg、（41.96±11.92） mg/kg、（20.61±7.76） mg/kg、（10.87±5.83） mg/kg、（7.81±2.12） mg/kg、（0.13±0.05） mg/kg和（0.055±0.03） mg/kg，Cu、Zn、Pb、Cr、As的年均含量在不同养殖品种之间无显著差异（P>0.05），虾塘和蟹塘沉积物中Cd和Hg年均含量均显著高于鱼塘。池塘沉积物中重金属地质累积指数（I_geo）由高至低分别为Cd、As、Cu、Zn、Cr、Hg、Pb，属清洁等级的样品占比均高于95%。鱼、虾、蟹塘沉积物中重金属潜在生态危害指数（RI）平均值分别为56.94、76.51和69.65，均属低风险等级。一致性沉积物质量基准（CBSQGs）评价结果显示池塘沉积物样品中重金属的平均可能效应浓度商（M_PEC-Q）均低于0.5，即重金属整体上不会产生生物毒性效应。

摘要:通过测量2008—2009和2018—2019年在北部湾海域沿岸北海和东方渔港采集的斑鳍白姑鱼（Pennahia pawak）样品，所得的生物学数据，利用FiSAT Ⅱ软件体长频率分析（ELEFAN）技术，分析斑鳍白姑鱼种群生长、死亡参数和开发率等的变化，以评估2个时段北部湾斑鳍白姑鱼的开发利用状况。结果显示：2008—2009和2018—2019年2个时段北部湾斑鳍白姑鱼优势体长分别为11~17 cm和10~15 cm，平均体长由14.83 cm减小到12.59 cm；优势体质量分别为30~100 g和10~80 g，平均体质量由85.88 g降低至52.91 g；2018—2019年的平均体长、平均体质量分别下降了15.1%和38.4%。2个时段异速生长因子b分别为2.84和3.00，表明斑鳍白姑鱼趋向匀速生长。估算的渐进体长由24.15 cm下降为22.05 cm，下降了8.7%，开捕体长由12.56 cm下降至10.29 cm，下降了18.1%。生长参数K分别为0.39和0.32；总死亡系数分别为1.39和1.17，自然死亡系数分别为0.98和0.90，捕捞死亡系数分别为0.41和0.28；估算的开发率分别为0.29和0.24。综上，北部湾斑鳍白姑鱼趋于小型化，目前该资源呈轻度开发状态。

摘要:2016—2018年对钱塘江西湖段鱼类进行分季节采样调查，共采集到鱼类31种，隶属7目9科27属，其中鲤科（Cyprinidae）鱼类最多，有21种，占总物种数的67.74%；按生态类群划分则以淡水定居性、中下层、杂食性鱼类为主；优势种为鲫（Carassius auratus）、鲢（Hypophthalmichthys molitrix）、刀鲚（Coilia nasus）、鳙（Aristichthys nobilis）、窄体舌鳎（Cynoglossus gracilis）。与历史记录相比，鱼类资源衰退较为明显，仅江海洄游性鱼类及河口性鱼类就减少了16种，且存在资源小型化、物种单一化的问题。Jaccard相似性系数显示任意两年之间的鱼类物种组成均处于中等不相似水平，ABC曲线也显示2016和2018年鱼类群落较稳定而2017年处于受干扰状态。鲢、鲫和鳙为该江段目前最主要的鱼类资源，分别占渔获物总质量的49.65%、20.14%和16.19%，其中鲢和鳙完全依靠增殖放流补充。绝大多数钱塘江传统土著经济鱼类虽有长期增殖放流的补充，但未在该江段形成优势种群。鱼类多样性指数虽有一定的季节及年际波动，但其变化未达到显著水平，鱼类群落结构的季节变化则与鱼类自身生活习性及水域内水文地理特征均有一定程度的关系。建议对钱塘江河口段持续开展全面的鱼类群落及鱼类生境调查，为制定细化的鱼类保护措施提供科学依据。

摘要:利用灰色关联聚类方法对1998—2017年5—12月柔鱼（Ommastrephes bartramii）的单位捕捞努力量渔获量（CPUE）进行聚类，分析不同强度厄尔尼诺和拉尼娜事件以及环境因子对柔鱼CPUE的影响。结果表明：年纬度向类群比年经度向类群的CPUE差异更明显，月经度向类群比月纬度向类群更具有季节性；强拉尼娜和弱拉尼娜事件集中的类群分类明显，厄尔尼诺、中强度拉尼娜和正常年份分类较模糊，年纬度向类群CPUE越高，海表面温度距平值（SSTA）越高，而叶绿素a质量浓度距平值（CHLA）越低。研究表明，不同强度的异常气候事件对柔鱼CPUE影响不同，强拉尼娜事件会使柔鱼CPUE骤增，弱拉尼娜事件会使柔鱼CPUE略减，而中强度以上的厄尔尼诺事件会使柔鱼CPUE大幅度下降。

摘要:根据2018年9—11月中国鱿钓船在北太平洋海域（41°05'N~43°45'N，154°05'E~159°43'E）采集的柔鱼（Ommastrephes bartramii）和北方拟黵乌贼（Gonatopsis borealis）样本，对样本的胴长（mantle length，ML）、体质量（body mass，BM）以及角质颚的12个形态学参数进行了测定，研究角质颚的生长特性。结果显示，两个种类在胴长和体质量上均存在极显著差异。主成分分析认为，上脊突长（UCL）最适合用来表征柔鱼角质颚的生长，UCL和下侧壁长（LLWL）最适合用来表征北方拟黵乌贼角质颚的生长。赤池信息量准则（akaike’s information criterion，AIC）认为：柔鱼的上头盖长（UHL）、下头盖长（LHL）、LLWL、下翼长（LWL）与胴长呈幂函数关系，UCL、上侧壁长（ULWL）、上翼长（UWL）、下脊突长（LCL）与胴长呈对数函数关系；北方拟黵乌贼的UHL、下喙长（LRL）和LLWL与胴长呈幂函数关系，UCL和LCL与胴长呈指数函数关系，上喙长（URL）、ULWL和LHL与胴长呈对数函数关系。逐步判别分析显示，上、下角质颚的判别正确率分别为92.70%和84.50%，并建立判别方程。研究认为，角质颚外部形态可较好地应用于2种头足类的判别。

摘要:构建副溶血性弧菌转录调节因子VtrB （V.parahaemolyticus T3SS2 regulator B）敲除菌株和回补菌株，探讨VtrB在副溶血性弧菌抵抗胆汁中的作用。根据GenBank数据库中副溶血性弧菌vtrB基因上下游序列设计引物，通过融合PCR将vtrB基因上下游同源臂融合并克隆入自杀质粒pDS132中，将重组自杀质粒转入大肠杆菌S17-1 λpir中，再接合转移至副溶血性弧菌中进行同源重组，通过10%蔗糖筛选获得vtrB基因突变株ΔvtrB。将pBAD33-vtrB重组质粒电转入ΔvtrB突变株中获得回补菌株C-ΔvtrB。研究副溶血性弧菌野生型、突变株和回补株在2%脱氧胆酸盐（DOC）处理后的存活率。基于同源重组原理，经vtrB基因的PCR扩增和转录水平检测结果表明，成功获得副溶血性弧菌vtrB基因缺失突变株ΔvtrB和回补株C-ΔvtrB。与野生型和回补菌株C-ΔvtrB相比，ΔvtrB突变株在2% DOC处理20、40和60 min后的存活率分别为17%、4%和1%，vtrB基因的失活使得副溶血性弧菌对胆汁抵抗能力极显著降低（P<0.001），表现出存活能力的缺陷。由此表明，转录调节因子VtrB有助于副溶血性弧菌对胆汁的抵抗。

摘要:以裸藻为原料，将粗提后的裸藻多糖（EGPS）经DEAE-纤维素和Sephadex G-100柱层析进行分离纯化，得到3个主要组分EGPS1-A、EGPS1-B和EGPS3-A，并对其进行纯度鉴定和抗氧化活性分析，将纯化后抗氧化活性较好的裸藻多糖进行分子量测定、单糖组成分析。纯度鉴定结果表明柱层析后得到的3个多糖组分纯度较高，红外光谱表明其均具有典型的糖类特征吸收峰。抗氧化实验表明3个多糖组分中EGPS1-A的综合抗氧化活性最高，分子量为136.8 ku，单糖组成包括甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖，单糖组分间物质的量比是0.072：0.430：0.049：0.010：0.260：0.620：0.530：0.180：1.010。