摘要:采用RT-PCR和RACE等技术克隆了斑鳜(Siniperca scherzeri)胃蛋白酶原C(pepsinogen C,PGC)的cDNA全长和部分DNA序列,结果表明:PGC cDNA序列全长1 505 bp,5'端非翻译区37 bp,3'端非翻译区304 bp,开放阅读框架(ORF)1 164 bp,共编码含有387个氨基酸的蛋白质,包括由16个氨基酸组成的信号肽、39个氨基酸的激活肽和332个氨基酸的成熟肽.斑鳜PGC氨基酸序列与斜带石斑鱼、伯氏豚虾虎鱼、狼鲈、美洲红点鲑4种鱼的相似度分别为92.0%、91.5%、90.2%、89.1%,与非洲爪蟾、鸡、人、兔、褐家鼠的序列相似度分别为76.8%、72.8%、72.5%、69.9%、67.3%,表明PGC基因在长期的进化中较为保守.PGC基因由9个外显子和8个内含子组成,内含子剪切位点符合GT-AG规则,在第7含子中发现(GACA)6、(CA)6类型的微卫星序列,第8内含子中发现(TG)5类型的微卫星序列.采用锚定PCR方法获得了PGC 5'侧翼区长1 924 bp的序列,启动子区域位于-40～+10 bp,包含TATA盒以及GATA-1、CdxA、Hand1/E47、AP-1、Nkx-2、S8、FOX J2等转录因子的结合位点.结果为进一步研究该基因的表达、功能及其转录调控特征奠定了分子基础.

摘要:转红色荧光蛋白基因唐鱼(Tanichthys albonubes)测交获得实验鱼,以表达红色荧光蛋白为表型性状,采用点杂交和遗传学分析相结合的方法,研究外源基因的遗传传递规律,并对转基因唐鱼和非转基因唐鱼的生长和繁殖等方面进行了比较.结果显示:测交后代表型的分离规律基本符合经典的孟德尔单显性基因遗传模式,外源基因属于单位点整合,测交后代中没有发现沉默整合个体;实验鱼的生长和可量性状对比实验表明,转基因唐鱼和非转基因唐鱼在仔鱼期到性成熟之间,生长速度无显著差异,性成熟个体的外部形态除体色外也无差别,繁殖力方面基本无显著差异.本研究结果表明了培育转红色荧光蛋白基因唐鱼纯系的可行性;同时在生长、繁殖方面的研究结果为评价转基因唐鱼的生态安全奠定了基础.

摘要:Hox基因是脊椎动物一类重要的生长和发育调节基因,其所编码具螺旋-转角-螺旋结构的转录因子能与靶基因特定区域DNA结合,从而调节动物胚胎发育过程中体轴的形成和器官组织的生长.本研究采用cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆了团头鲂HoxB3a的全长cDNA,并对团头鲂不同时期的胚胎和成鱼的不同组织进行了RT-PCR分析,以探索HoxB3a基因的时空表达特征.序列比对分析结果显示,团头鲂HoxB3a编码的氨基酸序列与斑马鱼(Danio rerio)、大西洋鲑(Salmo salar)、红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)、青鳉(Oryzias latipes)、条纹鲈(Morone saxatilis)、人(Homo sapiens)和小鼠(Mus musculus)的相似性分别为96%、85%、77%、76%、78%、66%和67%,同源性较高,这说明HoxB3a基因在长期的进化中具有较高保守性.RT-PCR结果表明,团头鲂HoxB3a基因从16 hpf(hours post fertilization)胚胎期到出苗期都有表达,在成鱼大部分器官或组织中具表达活性,预示该基因存在着重要的生物学功能.Hoxb3a基因全长cDNA的克隆、胚胎不同阶段表达及组织细胞表达特征研究,为进一步探索该基因的发育通路奠定了基础.

摘要:为了解瓯江彩鲤红、白两种体色差异的分子基础,应用抑制性差减杂交(SSH)技术对这两种体色的差异表达基因进行了初步研究,以"全红"体色(全身体表为红色)彩鲤的cDNA为检验cDNA(Tester),以"粉玉"体色(全身体表为粉白色)彩鲤的cDNA为比对cDNA(Driver),进行抑制差减杂交.对筛选出的42个阳性克隆进行测序和序列比对,发现16条EST序列,其余26个克隆为空载体序列.在16条EST序列中,6条为鲤的线粒体DNA序列(鲤的线粒体:16S rRNA序列,COⅢ),5条为斑马鱼的相关基因序列(斑马鱼的骺蛋白聚糖、核心蛋白聚糖、光蛋白聚糖等相关基因;斑马鱼新型免疫型受体基因,Olfm1蛋白合成基因;斑马鱼原骨胶原蛋白mRNA),1条为鲫的mRNA序列,2条与无脊椎动物基因相类似(利氏曼原虫的22号基因组基因;蝇的抗菌缩氨酸前体mRNA基因),另2条为未知基因序列;比对结果发现4条序列可能与体色有关.为进一步筛选鲤体色调控相关的功能基因奠定了基础.

摘要:通过比较二倍体野鲫、三倍体异育银鲫和复合四倍体银鲫等不同倍性鲫的染色体组型及红细胞核的形态大小差异,探讨了不同倍性鲫细胞遗传特征及其倍性鉴别的快速方法.结果表明:(1)二倍体野鲫体细胞染色体数为100,核型公式为22 m+ 34 sm+22 st+22 t,染色体臂数NF= 156;三倍体异育银鲫体细胞染色体数为 156 (其中6条为超数染色体),核型公式为33 m+51 sm+33 st+33 t+6 mc,染色体臂数NF=234+6 mc;复合四倍体银鲫体细胞染色体数为206 (其中6条为超数染色体),核型公式为44 m+68 sm+44 st+44 t+6 mc,染色体臂数NF= 312+6 mc.(2)二倍体野鲫、三倍体银鲫和复合四倍体银鲫的红细胞核长径、短径和核体积均依倍性增加而显著增大(P<0.05),其中,又以核体积增大最为显著,银鲫复合四倍体、异育银鲫三倍体的核体积分别为二倍体野鲫的2.0倍和1.65倍.通过在Coulter Counter颗粒分析仪上测量红细胞核体积可实现二倍体野鲫、三倍体银鲫和复合四倍体银鲫的快速鉴别.(3)在复合四倍体银鲫中还观察到较高比例(约占10%)的哑铃型红细胞核现象.

摘要:采用柱层析、蛋白免疫印迹和电泳等方法对哲罗鲑(Hucho taimen)的卵黄脂磷蛋白进行研究,并以其鼠抗和兔抗血清为抗体建立了夹心酶联免疫反应(ELISA)对生殖周期中哲罗鲑血清卵黄蛋白原浓度的变化进行检测.结果表明,哲罗鲑卵黄脂磷蛋白分子量在460 ku,并且由3个亚基组成,分子量分别为137.8 ku、84.2 ku和10.8 ku.蛋白免疫印迹表明,卵黄脂磷蛋白抗血清与雄鱼血清无特异性反应,而与雌鱼血清有特异的反应.本研究建立的双抗体夹心ELISA检测灵敏度为7.8 ng/mL,批内变异系数为4.06%,批间变异系数为4.58%,工作范围为30～2 000 ng/mL,在该范围内标准曲线具有良好的线性和重复性.生殖周期中哲罗鲑血清卵黄蛋白原浓度由每年6月份产孵后的最低值573.4 ng/mL升高到12月份的最高值1 918.2 ng/mL,卵黄积累持续期为6个月,整个生殖周期中血清卵黄蛋白原浓度只出现一个高峰期,表明人工养殖条件下,性成熟哲罗鲑的生殖周期为1年.

摘要:对赤潮多发藻米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi)核糖体18S rDNA及其转录间隔(ITS) 区序列PCR扩增并测序,获得18S rDNA和ITS基因序列长度分别为1 690 bp和654 bp.结合12种甲藻和1种硅藻作序列比较分析,分别在ITS1、ITS2序列寻找到适宜设计特异性引物探针区域,并用邻接法构建系统进化树,研究各藻种间亲缘关系.遗传距离分析结果显示米氏凯伦藻与短凯伦藻(Karena brevis)、微小卡罗藻(Karlodinium micrum )等分类学上较近的藻种18S rDNA序列相似度为97%～99%,远大于微小原甲藻(Prorocentrum minimum)、海洋原甲藻(P.micans)、塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)等在分类学上相距较远的藻种,各藻种间的ITS序列平均相似度明显低于18S rDNA序列.以18S rDNA与ITS序列构建的进化树拓扑结构相一致,18S rDNA序列相对保守,适合进行属以上关系的系统进化分析,而ITS序列变异较大,适合种属间鉴别分析,且ITS1和ITS2是变异很大的区域,适合种间的分子特异性鉴定,这为快速鉴别赤潮多发藻米氏凯伦藻提供了依据,进而为治理赤潮提供帮助.

摘要:为了探明九龙江口水域仔稚鱼种类组成及其分布,2007年12月-2008年11月,在九龙江口沿岸碎波带设置的5个站位点,每月大潮期间用小型拖网(1 m×4 m,网目1 mm)周年拖网120网次,采集到仔稚鱼4 961尾,隶属于37科64属,约91种(平均密度为41.3尾/网).其中6月的平均密度最大(158.1尾/网),2月最小(1.0尾/网).眶棘双边鱼(Ambassis gymnocephalus)为最优势种,占总数的35.40%,其后依次为多鳞鱼喜(Sillago sihama)(13.95%)、普氏缰虾虎鱼(Amoya pflaumi)(8.57%)、斑鱼祭(Konosirus punctatus)(7.24%)、多纪鲀属sp.1(Takifugu sp.1) (5.44%)、康氏侧带小公鱼(Stolephorus commersonii)(5.30%)、少鳞鱼喜(Sillago japonica)(4.88%)、星点多纪鲀(Takifugu niphobles)(1.55%)、长棘银鲈(Gerres filamentosus)(1.27%)和红尾银鲈(Gerres oyena)(1.27%).研究结果表明,九龙江口碎波带仔稚鱼的个体发育阶段主要为后弯曲期仔鱼和稚鱼期,分别占总数的64.44%和30.48%.

摘要:研究了太湖秀丽白虾抱卵群体生物学特征,并对其肌肉营养价值进行评价.于2008年4-5月在太湖三山岛水域采集秀丽白虾(Exopalaemon modestus)抱卵虾样本,对生物学指标进行了测量,并对肌肉营养成分进行了测定分析.抱卵群体平均全长、平均体长和平均体重分别为59.1 mm、47.5 mm和1.57 g,绝对怀卵量介于95～389粒之间,平均为212粒,相对怀卵量介于91～145粒/g之间,平均为113粒/g.胚胎发育各阶段卵径差异显著,囊胚期、无节幼体期和溞状幼体期分别为1.01 mm、1.07 mm和1.16 mm.抱卵虾肌肉水分含量为79.63%,粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量分别为16.57%、1.49%和1.40%,能量密度为4.597 KJ/g.肌肉干样赖氨酸和牛磺酸含量分别为6.70%和0.52%,必需氨基酸指数为65.81;不饱和脂肪酸含量为65.52%,其中单不饱和脂肪酸含量显著高于多不饱和脂肪酸含量,比值为1.49.钙磷比、锌铜比和锌铁比分别为0.84、3.26和2.87.太湖秀丽白虾抱卵群体表现出明显的小型化趋势,其主要营养指标均低于生长期.

摘要:根据室内工厂化养殖斑节对虾的体长和体重数据,对其生长特性及规律进行了研究.结果表明,其体长和体重呈幂函数关系:W=1.475×10-5L 2.9925,b接近于3,呈等速生长;其生长分快速生长期(42～70日龄)、稳定生长期(70～98日龄)、生长衰老期(98日龄以后)3个时期,各生长阶段的肥满度差异显著(P<0.05),生长早期(70 日龄左右)和后期(126 日龄后)较高(1.462～1.470),中期(84～112 日龄)较低(1.378～1.413).拟合出von Bertallanffy生长方程:Lt=113.22 [1– e -0.0145 ( t – 23.71) ], Wt=20.66 [1– e -0.0145(t–23.71) ]2.9925,体重生长拐点出现在99.3 d左右.根据研究结果,在实际养殖过程中,就预防病害和促进生长两个方面提出了具体可操作的建议.

摘要:用实验生态学方法研究了小球藻(Chlorella sp.)、绿色巴夫藻(Pavlova viridis)、小新月菱形藻(Nitzschia closterium f.minutissima)、亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)、微绿球藻(Nannochloropsis oculata)和湛江等鞭金藻(Isochrysis zhanjiangensis)对缢蛏稚贝摄食和生长的影响.结果表明:缢蛏稚贝对6种微藻的清滤率随浓度的增加而增大,当达到一定浓度时清滤率反而下降;在相同浓度下,稚贝对中规格的绿色巴夫藻、小新月菱形藻和湛江等鞭金藻的清滤率显著高于小规格的小球藻、微绿球藻和大规格的亚心形扁藻(P<0.05).不同微藻对缢蛏稚贝的存活率顺序为微绿球藻<小球藻+亚心形扁藻+微绿球藻<小球藻<湛江等鞭金藻<亚心形扁藻<小新月菱形藻<绿色巴夫藻+小新月菱形藻+湛江等边金藻<绿色巴夫藻.初始壳长无显著性差异的稚贝经30 d的生长试验,8个饵料组稚贝的壳长出现明显差异(P<0.05);亚心形扁藻组的日生长率均明显高于其他组(P<0.05),壳长增长率和绿色巴夫藻组无显著性差异(P<0.05).从本试验可知,小球藻、绿色巴夫藻、小新月菱形藻、亚心形扁藻、微绿球藻和湛江等鞭金藻的适宜投喂浓度为30×104、15×104、10×104、6×104、40×104和10×104cell/mL,绿色巴夫藻和亚心形扁藻对缢蛏稚贝的生长效果要好于其他微藻.

摘要:对14座山塘小水库进行为期1年的蚌鱼混养生产试验,运用Cobb-Douglas生产函数和数理统计方法,研究了吊养1+龄三角帆蚌的山塘小水库鱼类放养密度及比例.结果表明:利润率(P)与吃食性鱼每公顷放养量(FS)、饵料系数(FCR)的关系分别为P=-0.000 04FS2+0.100 4FS-20.006(R2=0.809 3)和P=1241.4FCR-4.450 2(R2=0.820 2);吃食性鱼和滤食性鱼增重倍数比(FWR)与放养量比(FSR)的关系为FWR=-0.569 7Ln(FSR)+1.420 8(R2=0.916);鲢和鳙增重倍数比(LWR)与放养量比(LSR)的关系为LWR=1.636 1LSR-0.544 8(R2=0.931).养鱼收入(Y)与鱼种(X1)、饲料(X2)、劳动力+租金(X3)和材料(X4)的投入量之间的关系为Y=e0.64X10.227X20.751X30.029X40.044(R2=0.983).分析认为:吊养珍珠蚌的山塘小水库鱼类合理放养技术参数:(1)吃食性鱼和滤食性鱼的放养比例为2.09∶ 1;(2)鲢、鳙的放养比例为2.71∶ 1;(3)鲢、鳙和吃食性鱼每公顷的放养量分别为469.8 kg、173.4 kg和1 344.15 kg.

摘要:采用不同浓度的3种消毒剂再处理经过暗沉淀、过滤初级处理的罗氏沼虾育苗废水24 h后,开展小球藻、蒙古裸腹溞培养与罗氏沼虾育苗的小型试验和生产性试验,依据培育效果探讨再处理废水的消毒剂适宜浓度.结果表明:培养小球藻的百杀迪、溴氯海因、臭氧再处理废水24 h的适宜浓度分别为10.0 mg/L、0.35 mg/L和28 mg/L,培养蒙古裸腹溞的百杀迪、溴氯海因、臭氧再处理废水24 h的适宜浓度分别为1.5 mg/L、3.0 mg和28 mg/L,培育罗氏沼虾幼体的百杀迪、溴氯海因、臭氧再处理废水24 h的适宜浓度分别为10.0 mg/L、10.0 mg/L和28 mg/L;并成功取得10 mg/L溴氯海因、28 mg/L臭氧再处理的废水培育罗氏沼虾幼体出苗率分别为30%、37%的生产性试验结果.

摘要:利用不适指数法对莆田地区的两个主要鲍增养殖区的环境质量进行了评价.结果表明:杂交鲍和杂色鲍两种鲍在莆田地区的主要不适环境因子是温度.杂交鲍在南日海区较适宜,全年可以养殖;罗屿海区有3个月(夏季)不适宜,需要转移到其他海区或采取降温措施.杂色鲍在多数月份不适指数大于0,高温期较适宜;低温期有3个月不适宜,应注意低温对鲍的伤害.除温度外,氨氮不适指数有2个月接近最适值下限,应调整养殖密度,保证养殖区内水流畅通.同时,要注意石油、重金属对增养殖区的环境和食品安全的影响.利用不适指数法的评价结果与实际养殖效果基本一致.

摘要:于2006年5-10月间对上海杨浦区部分景观水体的水质状况进行了调查,同时选用模糊综合评价方法对其现状进行了评价.评价过程中,重点对传统的模糊综合评判法进行了修正,对传统的评价因子、权重及算子的选择都进行了修正;将频率统计法用于评价因子的选择,克服了传统选择法的感性和不科学性;对权重的选择进行了创新性的修正,采用"相对距离法"确定了评价因子的权重,使之更为科学.选择了3种算子相结合的方法获得最终的算子,避免了偶然性,使结果更为准确.评价结果显示,此次调查区域内景观水体水质总体不容乐观,多数采样点以Ⅳ类和Ⅴ类水为主,分别占14.29 %和80.95%;总体上,Ⅴ类水出现比例随温度升高而增大;公园水体好于居民小区,而河道水质则最差.

摘要:对附着在条斑紫菜上的丝状细菌进行了详细的观察,结果表明,丝状细菌为无色、不分枝的丝状体,成熟的菌丝呈串珠状.菌丝体的基部可以进入细胞壁的表层,但不能穿透细胞壁.从大量附着丝状细菌的藻体上分离得到了丝状细菌菌株YL,经感染试验证实发病症状与自然海区患病紫菜的症状一致,说明该菌为条斑紫菜丝状细菌附着症的致病菌.对菌株YL的形态及致病性的研究结果表明,该菌为需氧革兰氏阴性菌,不能水解淀粉,接触酶呈阳性,在淡水中不能生长.在固体培养基上形成指纹状菌落;在液体培养基中所形成的微生子可聚集成玫瑰花环样结构及绳结状拓扑结构,初步确定其为毛霉亮发菌(Leucothrix mucor).该菌最适生长条件为盐度25～35,pH值为7.5～8.5,温度为10～25 ℃.

摘要:西方的民主行政理论是作为官僚制行政理论的对立面提出来的,中外学者关于民主行政理论的共识性要素是强调公民对公共决策的直接参与,这与共和主义民主的精义不谋而合.共和主义民主强调公民通过直接参与公共事务的决策,实现在场的民主,而获得政治效能感,从而夯实了公共权力行使的合法性根基.民主行政理论的提出,基于共和主义民主、自由主义民主以及合法性这三个维度观察,肇因于自由主义民主建制的合法性危机,而产生的对共和主义民主诉求的结果.自由主义民主建制的合法性危机集中表现为情境变迁导致的合法性危机、官僚制与民主的关系导致的合法性危机以及自由主义民主建制本身的合法性弱势.为了消解合法性危机,人们发掘了共和主义民主的长处,力图通过在既定代议制民主的框架下实现共和主义民主的增长与扩张来达到这一目的.

摘要:尽管人们对艺术的理解和诠释千差万别,但要真正获得艺术的真谛却不能忽略艺术原点中通达这一目标的途径和手段--技艺内涵.艺术不是空中楼阁,不是纸上谈兵,更不是纯理论的东西.可以说任何艺术都是以其一定的形态、技能技巧或特定材料而显现并能被感悟操作的东西.如果在专业教育、普通教育中,尤其是在基础教育中的艺术课程里,失去了这些必须掌握的最本质最重要的内容,那么培养所谓的学生的艺术能力和人文素养这一整合发展的总目标,实际上将会是一句空话.很显然,这样的结果最终将会导致艺术教育走向歧途.

摘要:由于人们生态环境意识不强,对水利工程引起的生态环境问题认识不足,有些水利工程在兴建后给渔业生态环境带来了不利影响,亟待深刻认识其对渔业资源的影响并制定相关对策措施.在分析水工建筑对渔业资源影响的基础上,提出了一些针对水工建筑建设的长江渔业资源的保护建议,包括工程性措施:修建过鱼设施、更新水工程建设理念、实施水库的生态调度;非工程措施:建立珍稀鱼类自然保护区(保护江段)、实行人工增殖放流、加强环境监测与科研、建立补偿机制、健全法制建设强化渔政管理、提高保护意识.

摘要:以克氏原螯虾(Procambarus clarkii)血清酚氧化酶为材料,采用Ashida的分光光度法测定了不同活力酚氧化酶与L-DOPA在60 min内每2 min生成物的吸光度以及计算了不同时间的酚氧化酶活力.结果显示,当测定时间为60 min时,随着酚氧化酶活力升高,吸光度与测定时间的直线相关系数逐渐降低,反映了测定的酚氧化酶活力准确性也越差,与其他已报道的南美白对虾(Penaeus vannamei)、中国对虾(Penaeus chinesis)和中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)等虾蟹类及昆虫(Pieris rapae)的酚氧化酶活力测定结果相似.与6 min时的相关系数和酶活力计算结果相比,当测定时间长于12 min时相关系数显著变小(P﹤0.05),而短于6 min时也有变小的趋势;当测定时间长于10 min时酚氧化酶活力计算结果显著变小(P﹤0.05).通过不同测定时长的相关系数以及酚氧化酶活力计算结果的差异性比较,得出酚氧化酶活力测定最为准确的测定时长(t)为6 min≤t＜10 min,最佳时长为6 min.

摘要:采用氯仿-甲醇提取法、苯酚-硫酸法、凯氏定氮法测定了红高头金鱼头瘤的粗蛋白、脂肪和碳水化合物含量,用光谱及色谱对红高头和黑高头金鱼头瘤的总类胡萝卜素含量及其组份进行了测定.结果表明:(1)红高头金鱼头瘤水分含量为92.19%,干物质中粗蛋白含量60.99%、脂肪含量为30.24%、碳水化合物含量为4.50%;(2)头瘤中的类胡萝卜素为虾青素、虾青素酯、角黄素、β-胡萝卜素和α-胡萝卜素5种,红高头金鱼头瘤中虾青素、虾青素酯、角黄素和β-胡萝卜素含量均显著高于黑高头金鱼;红高头金鱼头瘤中角黄素含量最多,为9.91%,而黑高头金鱼头瘤中含量最多的是β-胡萝卜素,为5.18%.