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基于耳石微化学Sr/Ca的浙江南部近海银姑鱼的生境履历重建  PDF

  • 黄庆竹 1,2,3
  • 黄慧娴 1,2,3
  • 李建华 1,2,3,4,5
  • 高春霞 1,2,3,4,5
1. 上海海洋大学 海洋生物资源与管理学院, 上海 201306; 2. 国家远洋渔业工程技术研究中心, 上海 201306; 3. 大洋渔业资源可持续开发教育部重点实验室, 上海 201306; 4. 农业农村部大洋渔业资源环境科学观测实验站, 上海 201306; 5. 农业农村部大洋渔业开发重点实验室, 上海 201306

中图分类号: S 931

最近更新:2024-05-21

DOI: 10.12024/jsou.20231204367

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摘要

浙江南部近海是我国重要的渔场水域,银姑鱼是该海域中常见的经济鱼类。研究针对浙江南部近海的银姑鱼栖息环境进行探究,以期揭示其个体发育过程中的环境变化史。实验基于该海域的银姑鱼耳石样品展开,并运用ICP-MS技术测定耳石微结构的Sr、Ca等元素。通过分析Sr/Ca比值,发现银姑鱼的栖息环境变动范围为3.39×10-3~8.12×10-3,表明其存在咸淡水定居型和咸淡水-海水混合型两种生境类型,另外Sr元素也被证实能有效地示踪鱼类的生境履历。这一发现不仅丰富了我们对银姑鱼生态习性的理解,也为银姑鱼洄游路径研究提供较为可行和准确的方法和途径。

耳石是硬骨鱼体内的钙碳酸盐岩结构体,不仅具有听觉和维持平衡的作用,还能提供鱼类个体一生所在栖息地的生境信

1-2。耳石被称为时间和水体环境的“记录器3,其生长具有可持续性、代谢惰性,这使得耳石成为一种理想的自然生境标记材料,因此目前基于耳石微化学技术重建鱼类生境履历已是鱼类生活史研究领域的热点之4。河口栖息的鱼类在不同生活史阶段往往会在咸淡水等不同环境中栖息生存。耳石中包含了Sr、Mg等微量元素,Ca元素的含量占到了99%以上。海水中的Sr和Ca含量较高,河口区中等,而淡水区较低,这一特点为利用Sr/Ca比值来研究鱼类的生境履历提供了理论基5。JIANG6利用耳石微化学技术,探究了洄游性刀鲚(Coilia nasus)幼鱼的生境履历,研究发现,它们需要在淡水中生活近一年的时间才慢慢转入盐度较高的海域生活,并且不同地区刀鲚的生活履历也存在差异。另外,杨琴7也是利用了该技术对长江口及邻近海域凤鲚(Coilia mystus)生境履历进行重建,首次证明了长江口及邻近海域凤鲚存在 3 个孵化场及 4 种生境履历类型, 准确反映了凤鲚个体组成及其生活史的多样性和复杂性。耳石中Sr/Ca比值的变化能客观有效地反演鱼类生活史中不同盐度生境履历的改变,在重建生境履历方面发挥巨大的作8

浙江南部近海受沿岸上升流、台湾暖流及黑潮暖流的影响,水域内的营养盐和饵料生物丰富,为鱼类提供了良好的繁殖和育肥场

9。银姑鱼 (Pennahia argentata)也称白姑鱼,隶属鲈形目 (Perciformes)石首鱼科(Sciaenidae)银姑鱼属(Pennahia) ,喜暖温水,栖息于40~100 m 深的海岸海湾的沙质或泥质底10,是我国常见的经济鱼类,常做近海洄游,广泛分布于我国南海、东海、黄海和渤海沿岸,在浙江南部近海渔业中占有重要的地11。在2000年银姑鱼全国范围内的捕捞量已下滑至22万t ,而到2020年捕捞量已不到9万t ,渔业资源呈明显下滑趋12。由于长期的过度捕捞,银姑鱼渔获组成出现低龄化、小型化和性早熟现象,马超13在闽南海域采集的2017—2018年银姑鱼样本体长为45~202 mm ,鉴定出1~2龄个体居多,而JEON142018年调查韩国南部海域银姑鱼样本体长为128~357 mm ,二者相比,我国近海的银姑鱼渔获体长明显较小。

对银姑鱼的洄游、生活史等生物学研究多集中在早期,近年来对东海银姑鱼的研究甚少,在银姑鱼资源量明显下降的形势下,重建银姑鱼生境履历,可以建立起完善的生境“地图”,再根据“地图”上每片水域的生态条件,制定相应的养护管理措施,能有效地帮助其资源的养护和可持续发展。因此,本研究通过对银姑鱼耳石的微量元素进行分析,尝试探究银姑鱼在个体发育过程中所处栖息环境的盐度变化履历,旨在为银姑鱼洄游路径研究提供较为可行和准确的方法和途径。

1 材料与方法

1.1 样品采集

实验所用样本均采自浙江南部近海,调查网具为底拖网,采样时间为2019年8月和11月,具体调查站位如图1所示。渔获冷冻后带回实验室测量分析,在实验室内采集银姑鱼样品生物学数据,采集数据类型包括体长、体质量和性别,长度测量精确至1 mm ,质量测量精确至0.1 g 。使用镊子于银姑鱼内耳囊中摘取左、右矢耳石,去除表面结缔组织后放入装有95% (体积分数) 乙醇溶液的离心管中编号保存。本实验统一使用左矢耳石,若左矢耳石破裂,则以右矢耳石代替。

图1  浙江南部近海调查站位

Fig.1  Survey stations in the offshore waters of Southern Zhejiang

1.2 微量元素测定

在元素分析前,耳石均经过超声波清洗除污、干燥、环氧树脂包埋固定风干后沿短轴切割、双面研磨,制作成耳石核区充分暴露、厚度500 μm左右的切片,置于光学显微镜 (OlympusCX23)下,拍照系统自带显微图像分析处理软件 (FCSnap) 测量耳石轮径和半径 (精确到0.01 mm )。使用GeoLas HD激光剥蚀系统利用193 nm 准分子激光在耳石样品沿耳石切片的腹缘轴线从核心至边缘每隔60 μm连续打点(剥蚀点位置与年龄读取的轴方位一致),选这条轴线是因为它可以通过耳石微结构分析清晰地辨别对应个体洄游过程中各不同生活史阶段的耳石区

15,具体银姑鱼矢耳石激光剥蚀点位置如图版所示。激光剥蚀点定位通过配置在激光系统的反射光显微镜在计算机上的成像系统控制完成,每个区域3个元素值的平均值表示其元素组成,待测定元素的含量通过碳酸盐标样定量获得。激光剥蚀点直径为44 μm,剥蚀时间 55 s ,激光能量为 80 mJ左右,频率为 5 Hz 。剥蚀后的样品通过Ar和 He 混合气体 (气流量控制在 0.6 L/min) 送入 ICP-MS ,在无任何样品条件下对Ar、He 混合气体进行 LA-ICP-MS 测试,以确定元素检测限水平。以上测定均在上海海洋大学大洋渔业资源可持续开发教育部重点实验室年龄和生长研究中心完成。

图版  银姑鱼矢耳石激光剥蚀点位置

Plate  Laser ablating positions of sagittaeotolith of P. argentat

1. 幼鱼耳石磨片打点示意图;2.成鱼耳石磨片打点示意图。

1. Sampling points of otolith grinding template of juvenile;2.Sampling points of otolith grinding template of adult.

考虑采样站点、体长和年龄等指标,选取已进行激光剥蚀取样的11个银姑鱼样本 (1~4龄) 矢耳石的Sr/Ca比值数据进行分析,样品信息见表1

表1  激光剥蚀-电感耦合等离子体质谱仪测试样本列表
Tab.1  Sample list of LA-ICP-MS

编号

Code

年龄

Age/y

性别

Sex

体长

Length/mm

体质量

Body mass/g

1 1 雌性 129 50.2
2 1 雌性 116 36.8
3 1 雌性 137 54.0
4 2 雌性 145 73.1
5 2 雄性 159 87.6
6 2 雄性 158 77.8
7 3 雄性 174 123.9
8 3 雄性 154 77.8
9 3 雌性 160 89.9
10 4 雌性 200 185.9
11 4 雄性 186 144.9

1.3 数据分析

由于耳石中Sr的含量受环境影响大而Ca含量波动幅度小,按国际惯例,将Sr浓度标准化为Sr:Ca×103比值。使用Excel 2019进行数据计算,并绘制银姑鱼个体Sr/Ca比值变化折线图。参考卢明杰

16的研究,引入STARS方法 (Sequential t-test analysis of regime shifts) ,按照截断长度为10依据,Huber权重为1依据,置信度P为0.1绘制耳石Sr/Ca比值格局转变曲线。使用SPSS 26.0进行非参数检验(Mann-Whitney U-test)。参考杨琴7区分淡水、咸淡水和海水的Sr/Ca×103(淡水<3、咸淡水3~7、海水>7)来分析浙江南部近海银姑鱼个体生活水体的特征。

2 结果

浙江南部近海银姑鱼耳石核心至边缘的Sr/Ca比值波动:总体上看最小值为3.99×10-3,最大值为8.12×10-3,某些样品偶有一次较高的Sr/Ca比值,其他耳石的最大值基本在3×10-3~6×10-3之间波动。结合图2表2分析,除NO.3的两个阶段无显著性差异 (P>0.05, Mann-Whitney U-test)外,大体可以分为2~3个阶段,且相邻阶段差异性显著(P<0.05) ;个体上看,耳石中Sr/Ca比值变化各有不同,大概可分为两类:一类耳石样品Sr/Ca比值核心区域较低,至其他区域随年龄增大而呈现阶段性增大,包括NO.6、NO.9和NO.11;另一类样品Sr/Ca比值核心区域较低,其他区域随年龄增大而呈现阶段性减小的趋势,包括NO.1、NO.2、NO.4、NO.5、NO.7、NO.10和NO.11。

图2  银姑鱼耳石核心到边缘的Sr/Ca比值变化和格局变化

Fig.2  Sr/Ca ratio changes and pattern changes from the core to the edge of otolith of P.argentata

表2  银姑鱼矢耳石中Sr/Ca比值变化
Tab.2  Fluctuation of Sr/Ca ratio in the otolith of of P.argentata

样本编号

Sample

年龄

Age

核心区Sr/Ca比值

Sr/Ca ratio of the core

Sr/Ca比值变化阶段

Change phase of Sr/Ca ratio

耳石径长

Distance from the core/μm

Sr/Ca×103
NO.1 1 5.99 1a 0~480 5.88±0.34
2b 480~1 080 5.02±0.33
NO.2 1 7.83 1a 0~480 6.46±0.60
2b 480~1 140 5.31±0.51
NO.3 1 5.88 1 0~1 260 5.65±0.52
NO.4 2 5.57 1a 0~480 5.58±0.15
2b 480~1 080 5.07±0.18
3a 1 080~1 260 5.44±0.21
NO.5 2 4.98 1a 0~480 5.71±0.59
2b 480~1 320 4.64±0.49
NO.6 2 4.97 1a 0~360 5.73±0.38
2b 360~960 5.17±0.21
3a 960~1 380 6.29±0.43
NO.7 3 5.79 1a 0~780 5.98±0.22
2b 780~1 320 5.40±0.37
NO.8 3 4.58 1a 0~900 4.43±0.28
2b 900~1 220 6.38±0.74
NO.9 3 4.89 1a 0~540 5.07±0.40
2b 540~1 380 6.31±0.76
NO.10 4 6.03 1a 0~1 200 5.73±0.29
2b 1 200~1 740 5.55±0.64
NO.11 4 5.91 1a 0~420 5.59±0.23
2b 420~1 500 4.59±0.25

注:  同一样本中上标字母相同,表示不同阶段差异不显著(P>0.05),字母不同代表差异显著(P<0.05)。

Notes:   Phases in one otolith sample having the same letter indicate insignificant differences (P>0.05); whereas different letters indicate significant differences (P<0.05).

图2显示,NO.8、NO.9、NO.10分2个阶段,第 1 阶段分别为从耳石核心至900、540、1 200 μm的区域,Sr/Ca比值最低;第2阶段为上述距离至边缘的区域,Sr/Ca比值显著高于第 1 阶段(P<0.05)。NO.6分为3个阶段,第1阶段为核心至360 μm的区域,Sr/Ca比值较高;第2阶段为360~960 μm区域,Sr/Ca比值最低;第3阶段为960 μm至耳石边缘,Sr/Ca比值最高;其中第1阶段与第3阶段之间差异性不显著( P>0.05)。

NO.1、NO.2、NO.5、 NO.7和NO.11分为2个阶段,第1阶段分别为从耳石核心至480、480、480、780、420 μm的区域,Sr / Ca比值最高;第2阶段为上述距离至边缘的区域,Sr/Ca比值显著低于第 1 阶段(P<0.05)。NO.4分为3个阶段,第1阶段耳石核心至480 μm区域,Sr / Ca比值最高;第2阶段在480~1 080 μm区域,比值最低;第3阶段为1 080 μm至边缘区域,Sr / Ca比值高于第2阶段,略低于第1阶段,且与第1阶段差异性不显著 (P>0.05) 。

3 讨论

已有研

17-18证明,环境元素浓度变化是影响鱼类耳石元素摄取的决定性因素,所以通过对耳石样品中对应区域Sr/Ca比值的变化,我们可以研究银姑鱼的生境变迁,重建其生境“地图”。结合图表的信息我们能发现,在距核心的一定位置,部分样品会出现显著特征,如在480 μm处出现阶段变化,在900~960 μm处出现与核心附近相似的升降趋势 (图2)。参考陈佳杰19所分析的东、黄渤海银姑鱼洄游路线可知,在东海近海海域存在3个银姑鱼产卵场,禁渔线外有一大范围的索饵场。幼鱼索饵要游至禁渔线外的索饵场,距核心480 μm处的变化极有可能是银姑鱼个体进行索饵时生境发生了转变,不同位置的产卵场向同一位置索饵场游动,就会出现两类Sr/Ca比值变化趋势不同的情况。银姑鱼的拐点年龄在1.19左20,此时银姑鱼达到性成熟,要进行产卵洄游,而960 μm左右的区域出现周期现象,说明该区域附近是银姑鱼耳石出现1龄年轮的位置。

水体盐度与鱼类耳石中Sr/Ca比值与淡水、咸淡水、海水盐度呈相关关系,可以通过对耳石中Sr/Ca比值的分析来反演研究鱼类个体在不同盐度的水域动态变

21。本研究的银姑鱼样本年龄在1龄到4龄不等,从耳石核心到边缘的Sr/Ca比值变化波动不大,平均值最小为(4.43±0.28)×10-3 (NO.2) ,最大为(6.46±0.60)×10-3(NO.8) ,都在3<Sr/Ca<7范围内,均无Sr/Ca<3的情况。对个体生境履历进行分类,可以得到以下几种类型 (图3) :第一种为咸淡水定居型,生境履历的不同阶段均为3<Sr/Ca<7,包括NO.1、NO.3、NO.4、NO.5、NO.6、NO.7、NO.11,涵盖各个年龄阶段 (1~4龄) 。尽管这些样品个体在不同阶段显示出差异变化,但阶段平均值最低(4.59±0.25)×10-3,最高(6.29±0.43)×10-3;个体变化最低值4.03×10-3,最高值6.63×10-3,整体平稳处于咸淡水中生活。第二种为咸淡水-海水混合型,个体生境履历存在3<Sr/Ca<7和Sr/Ca>7两种特征,包括NO.8、NO.9、NO.10,样品年龄分别为3龄、3龄、4龄。这些样品存在两个阶段的变化,第一阶段3<Sr/Ca<7,说明个体在这段时期生活在咸淡水水域中,Sr/Ca>7出现在第2阶段,处于个体生长后期的后期。除NO.9存在多次Sr/Ca>7的特征,其他样品Sr/Ca>7均只出现一次,推测这种类型的个体并不会长期处于海水中,高盐度水域生活史属于偶然经历,因为生长个体较大,游泳能力较强,能游至盐度较高的海水水域边缘摄食。

图3  浙江南部近海银姑鱼生境履历模式(红色三角形所在区域为孵化区域)

Fig.3  Life history patterns of P. argentata from the offshore waters of southern Zhejiang (the red triangular area means the incubation area)

在11尾样品中,NO.2的Sr/Ca比值变化最为特殊,仅核心区Sr/Ca>7,其他区域再无经历海水生境的迹象,由表2可得,浙江南部近海银姑鱼核心区Sr/Ca比值存在3<Sr/Ca<7和Sr/Ca>7的情况,表明银姑鱼早期孵化场存在咸淡水孵化与海水孵化两种。但咸淡水孵化的个体占多数,出现海水孵化的个体仅有NO.2一个,结合其整体经历,存在海水孵化场的可能性不大。银姑鱼受精卵为浮性

22,由此推断该海水孵化个体可能属于咸淡水孵化个体,其受水流的影响才进入到海水水域中孵化。因此,将NO.2归为第一种类型。

4 总结

对2019年夏、秋两季所有航次,所有采样站点的盐度进行平均可知,夏季平均盐度为33.26±0.96,秋季平均盐度为31.6±1.37,表明采样站点都在咸淡水水域。根据以上个体Sr/Ca比值变化分析,本实验调查海域的银姑鱼Sr/Ca比值为3.39×10-3~8.12×10-3,存在咸淡水定居型和咸淡水-海水混合型两种生境类型。本研究调查海域的银姑鱼种群稳定生活在咸淡水中,与实际采样水域的类型是相一致的,说明Sr元素是示踪银姑鱼生境的环境敏感因子,并且到目前为止,利用耳石Sr、Ca元素“指纹”来研究鱼类的生活史的研究有很

23-26,因此我们通过耳石微化学方法研究银姑鱼生活史,反演银姑鱼个体生境履历是客观的并且可靠的。

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