暗纹东方鲀组织内TTX含量与钠离子通道基因表达特征分析

王婧，王润，林梦娇，王亚宁，鲍宝龙，龚小玲; WANG Jing; WANG Run; LIN Mengjiao; WANG Yaning; BAO Baolong; GONG Xiaoling

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暗纹东方鲀组织内TTX含量与钠离子通道基因表达特征分析 PDF

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王婧 ^1,2
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王润 ^1,3
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林梦娇 ^1,3
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王亚宁 ^3,4
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鲍宝龙 ^1,2
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龚小玲 ^1,2
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1. 上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室，上海 201306； 2. 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心，上海 201306； 3. 中国水产科学研究院黄海水产研究所，山东青岛 266071； 4. 青岛大学生命科学学院，山东青岛 266071

中图分类号： S 917

最近更新：2024-03-18

DOI： 10.12024/jsou.20230504188

摘要

为了探究暗纹东方鲀（Takifugu obscurus）组织内河鲀毒素（Tetrodotoxin，TTX）含量与含毒组织电压门控钠离子通道基因表达特征。分别采用酶联免疫法（ELISA）测定暗纹东方鲀肝脏、心脏等8个组织 TTX含量，实时荧光定量（RT-qPCR）方法检测电压门控钠离子通道α亚基基因家族成员scn1aa，scn1ab，scn4aa，scn4ab，scn5aa，scn5ab，scn8aa，scn8ab（以下简称“电压门控钠离子通道基因”）在各组织中的相对表达特征。结果显示：各组织中TTX含量由高到低为脑（9.521±2.816） μg/g、心脏（4.271±1.129） μg/g、鳃（1.586±0.527） μg/g、肌肉（1.494±0.938） μg/g、肝脏（0.913±0.206） μg/g、皮肤（0.902±0.235） μg/g、肠道（0.894±0.215） μg/g和眼（0.864±0.287） μg/g，脑、心脏组织为弱毒性，肝脏、皮肤、肌肉、眼、肠道、鳃组织为微毒性。RT-qPCR结果显示scn1aa、scn1ab、scn4ab、scn5aa、scn5ab、scn8aa、scn8ab基因均在肝脏组织的相对表达量最高，scn4aa基因仅在肌肉组织表达，皮肤组织仅有scn4ab基因表达，且scn4ab基因在所有检测组织中均有表达，表达具有广泛性。钠离子通道基因在斑马鱼和暗纹东方鲀组织表达特征存在差异。

关键词

暗纹东方鲀; 电压门控钠离子通道; 河鲀毒素; 荧光定量PCR

暗纹东方鲀（Takifugu obscurus）隶属于鲀形目（Tetraodontiformes）鲀科（Tetraodontidae）东方鲀属（Takifugu）^［

1］，主要分布在中国近海（东、黄、渤海）和长江中下游，属江海洄游性鱼类，春季亲鱼自海逆河产卵，幼鱼在长江、湖泊中肥育，翌年春入海^{［参考文献 2

百度学术}2］。河鲀毒素（Tetrodotoxin，TTX）是一种毒性很强的小分子非蛋白神经类毒素，在自然界广泛存在^{［参考文献 3-4}3-4］，TTX在暗纹东方鲀体内的分布具有组织差异，含量也与发育阶段和生活环境密切相关^{［参考文献 5-8}5-8］。

电压门控钠离子通道（Voltage-gated sodium channel，Nav/scn）是一类位于细胞膜表面，由1个α亚基、1个或2个 β 亚基组成的跨膜蛋白^［

9-10］，α亚基是电压门控钠离子通道基因的主要结构，也是行使基本功能的单位^{［参考文献 11

百度学术}11］，电压门控钠离子通道α亚基的4个同源结构域围绕形成一个供钠离子通过的孔道，TTX能特异性与该孔道结合，阻碍钠离子内流，抑制动作电位的去极化和传导^{［参考文献 12

百度学术}12］，导致机体因呼吸和心脏血管衰竭死亡^{［参考文献 13

百度学术}13］。电压门控钠离子通道基因家族在硬骨鱼类中包含8个同源成员（scn1aa、scn1ab、scn4aa、scn4ab、scn5aa、scn5ab、scn8aa 和scn8ab）^{［参考文献 14

百度学术}14］，依据对河鲀毒素的敏感性，分为TTX敏感型（TTX-sensitive）和TTX耐受型（TTX-resistant）^{［参考文献 15

百度学术}15］。但在鲀毒鱼类已发现部分电压门控钠离子通道基因序列在孔道区域发生氨基酸的取代，使TTX结合难度提升，从而形成对TTX的抗性^{［参考文献 14

百度学术}14，16］。电压门控钠离子通道基因家族在哺乳动物^{［参考文献 17

百度学术}17］和斑马鱼中表达具有组织特异性，目前对电压门控钠离子通道基因在鲀毒鱼类含毒组织中的表达特征的研究较少。

本研究以暗纹东方鲀为研究对象，采用酶联免疫法（ELISA）测定暗纹东方鲀各组织中TTX含量，实时荧光定量（RT-qPCR）方法检测电压门控钠离子通道基因家族在各组织的相对表达特征，分析各组织TTX含量与电压门控钠离子通道基因表达特征，以期为东方鲀属鱼类耐受TTX机理研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 样本采集

实验所用野生暗纹东方鲀2022年12月采自江苏省南通市，共采集20尾，平均体长（21.595±0.791） cm，平均体质量（252.034±21.916） g。活体运回实验室，随机选取10尾进行解剖，各取2份肝脏、皮肤、肌肉、心脏、眼、脑、肠道、鳃组织（由于无法分辨雌、雄，故没有提取性腺）放至2 mL的无酶离心管中，1份-20 ℃冰箱保存，用于河鲀毒素的检测，1份液氮速冻后置于-80 ℃冰箱保存，用于总RNA提取。

1.2 各组织TTX含量的测定

将各组织称重，按1∶4比例加入生理盐水（不足0.25 g的组织加入1 mL），使用全自动样品快速研磨仪破碎组织，4 ℃ 3 000 r/min离心10 min，取上清液作为待测样品。使用河鲀毒素（TTX）ELISA检测试剂盒（江苏酶免实业有限公司，货号：MM-95307O1），检测肝脏、皮肤、肌肉、心脏、眼、脑、肠道、鳃组织中河鲀毒素含量，单位为每克组织中TTX含量（μg）。

1.3 各组织电压门控钠离子通道基因的表达

1.3.1 总 RNA 提取与 cDNA 合成

使用 Trizol法提取3尾暗纹东方鲀各组织的总RNA，使用 Pultton 微量核酸浓度仪测定RNA浓度及 A₂₆₀/A₂₈₀，琼脂糖凝胶电泳检测RNA 质量，并使用HiScript Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis Kit （+gDNA wiper）（诺唯赞，货号：R312）合成 cDNA。

1.3.2 电压门控钠离子通道α亚基序列获取与验证

暗纹东方鲀电压门控钠离子通道基因仅有scn4aa DNA序列已公布（ON262318.1），其余7条序列未知。在CNGBdb数据库获得暗纹东方鲀全基因组拼接序列（登录号：CNA0013723），使用同源预测（Homology-based prediction）的方法对暗纹东方鲀电压门控钠离子通道基因进行注释，将序列阅读档案（Sequence read archive， SRA）数据库获得的暗纹东方鲀无基因结构注释的全基因组序列（登录号为SRR7081561和SRR10127925）作为补充数据，对注释得到的序列进行校准，获得其余7条电压门控钠离子通道基因预测序列。

依据预测序列，使用Primer 5.0软件设计电压门控钠离子通道基因约2 000 bp长度的引物，引物由青岛擎科生物技术有限公司合成（表1）。使用各组织混合cDNA模板进行PCR扩增。总体系为20 μL：PCR Mix （TaKaRa，货号： KMM-201） 10 µL， F 1 µL（10 µmol/L）， R 1 µL（10 µmol/L），cDNA 模板 1 µL，ddH₂O 7 µL。PCR 扩增程序：94 ℃预变性 2 min；98 ℃变性 10 s，59 ℃ 退火5 s，68 ℃延伸 30 s，35 个循环。PCR产物进行凝胶电泳检测，将条带大小与目的片段一致片段切下，使用胶回收试剂盒（南京诺唯赞生物科技股份有限公司，货号：DC301）进行回收纯化。纯化后的产物连接到 T 载体中，转入Trans1-T1 感受态细胞（北京全式金生物技术股份有限公司，货号：CD201）中，冰浴 30 min 后 42 ℃热激 30 s，置于冰上 2 min 后加入 500 µL 无抗 LB 培养基，37 ℃摇床摇菌 1 h，取 200 µL 菌液于超净工作台中涂板（含Amp抗生素），培养过夜。次日，挑单克隆并进行菌液 PCR 验证，将条带大小符合预期的送青岛擎科生物技术有限公司测序。

表1 本研究中所使用的引物

Tab.1 Primers used in this study

引物 Primer	序列Sequence（5'-3'）	目的 Purpose
scn1aa-af	GCTCTGTTCCAGTCCGTGAA	ORF verification
scn1aa-ar	CATGCCAACCACATTTGCCA	ORF verification
scn1ab-af	CAGCAAGTACCCTGTGGAGG	ORF verification
scn1ab-ar	ATCTTCAGCAAGCACTCCCC	ORF verification
scn4ab-af	CGCTTTGAGGGAATGAGGGT	ORF verification
scn4ab-ar	CATGTTGACCACGACCAGGA	ORF verification
scn5aa-af	GGAAGCCAGGTCAGCATCTT	ORF verification
scn5aa-ar	TCAGATCGCCGTCTTCATCG	ORF verification
scn5ab-af	GACTGAGGAGTTCAACGGCA	ORF verification
scn5ab-ar	GTCAAGCCAGCACCAGTAGT	ORF verification
scn8aa-af	CATTCCGATTGCTGCGAGTG	ORF verification
scn8aa-ar	GCGCCCACATTGTCAAAGTT	ORF verification
scn8ab-af	CGCCAACACCTTCCTCATCT	ORF verification
scn8ab-ar	GACACACCAACAGCACGTTC	ORF verification
β-actin-qf	GAGCGTGGGTACTCCTTCAC	RT-qPCR
β-actin-qr	CCATCTCCTGCTCGAAGTCC	RT-qPCR
scn1aa-qf	AGCTCCTCAGACGCCTCTAA	RT-qPCR
scn1aa-qr	GCTGTCCTGGGACTCCAATT	RT-qPCR
scn1ab-qf	TCATGGGCGTCAACCTCTTC	RT-qPCR
scn1ab-qr	GCGGACACTCTCGTTAACCA	RT-qPCR
scn4aa-qf	CCCTTCCAAGAACCCGTTGA	RT-qPCR
scn4aa-qr	GACGCTTCTCTTCGCTCTGA	RT-qPCR
scn4ab-qf	TGCTCTGATCGAGGCAAACT	RT-qPCR
scn4ab-qr	ACATCTCTGGAATCCACCGC	RT-qPCR
scn5aa-qf	AACGGAGGGACTGATAGCCT	RT-qPCR
scn5aa-qr	AGGAAGGTGGTGAGGACAGT	RT-qPCR
scn5ab-qf	CTGCTTCGTGTCTTTAAGCTGG	RT-qPCR
scn5ab-qr	GATGAAAACGATGATGGCGAGG	RT-qPCR
scn8aa-qf	CACTCGTTCCTGATTGTCTTCC	RT-qPCR
scn8aa-qr	TTCAAAACCACCAAGTTTCCGA	RT-qPCR
scn8ab-qf	GTAAGATAGCCCCGTCCTGC	RT-qPCR
scn8ab-qr	TGCAGTCCCACATGGTTTCA	RT-qPCR

1.3.3 实时荧光定量检测基因表达

依据测序序列，使用Primer 5.0软件设计各基因特异性引物，用于定量研究（青岛擎科生物技术有限公司合成，表1）。扩增体系参照诺唯赞荧光定量试剂盒（20 μL）：10 μL ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix（南京诺唯赞生物科技股份有限公司，货号：Q711），1 μL cDNA，0.8 μL基因特异性引物（10 µmol/L），8.2 μL无酶水，每个样品设3个重复。反应在ABI 7500 Fast平台进行，反应程序：95 ℃预变性 30 s，两步法（95 ℃ 5 s， 60 ℃ 34 s，40 个循环）；反应结束后绘制熔解曲线以确保扩增的特异性和准确性。以β-actin 为内参进行RT-qPCR 分析。利用 2^–ΔΔ^Ct 方法计算各基因的相对表达量。

1.4 数据分析

TTX含量数据以平均值±标准差（Mean±SD）在表格中显示，使用Origin 2022软件绘制标准曲线，采用SPSS 17.0 软件对TTX含量和荧光定量PCR生成的数据进行单因素方差分析（One-way ANOVA），以P＜0.05为差异显著，字母相同代表组间不存在显著性差异。

2 结果

2.1 各组织TTX含量

使用ELASACalc软件，以标准品浓度作横坐标，对应在450 nm处的吸光值作纵坐标，使用四参拟合方程，绘制TTX标准曲线（图1）。暗纹东方鲀的肝脏、皮肤、肌肉、心脏、眼、脑、肠道、鳃等组织均检测出河鲀毒素，脑组织中TTX含量最高，为9.521 μg/g；其次为心脏（4.271 μg/g），TTX含量从高到低依次为脑>心脏>鳃>肌肉>肝脏>皮肤>肠道>眼，最高和最低的组织间相差11.1倍（表2）。按＜10 MU/g（MU：鼠单位；1 MU相当于约0.2 μg的TTX）为微毒性；10~100 MU/g为弱毒性；＞100 MU/g为剧毒性^［

18-19］。对各组织的毒性进行划分，本批次检测的暗纹东方鲀脑、心脏组织为弱毒性，肝脏、皮肤、肌肉、眼、肠道、鳃组织为微毒性。

图1 TTX标准曲线

Fig.1 Standard curve for TTX

表2 暗纹东方鲀各组织TTX含量

Tab.2 TTX content in different tissues of T.obscurusn=10

组织 Tissues	TTX含量 TTX content/（μg/g）	组织 Tissues	TTX含量 TTX content/（μg/g）
肝脏Liver	0.913±0.206^a	眼Eye	0.864±0.287^a
皮肤Skin	0.902±0.235^a	脑Brain	9.521±2.816^c
肌肉Muscle	1.494±0.938^a	肠道Intestine	0.894±0.215^a
心脏Heart	4.271±1.129^b	鳃Gill	1.586±0.527^a

注：不同上标字母表示组间差异显著（P<0.05）。

Notes： Different superscripts in the same column indicate significant differences （P<0.05）.

2.2 电压门控钠离子通道 $α$ 亚基在各组织中的表达

暗纹东方鲀scn1aa基因在各组织的表达情况如图2a，以鳃为标准1.0，该基因在肝脏、心脏、眼、脑、鳃、肠道的表达量分别为851.8、0.9、4.2、1.2、1.0、0.8，在皮肤和肌肉中未检测到该基因的表达信号。肝脏与其他组织的相对表达量均存在显著性差异（P<0.05）。与scn1aa基因类似，scn1ab基因也在肝脏中表达量最高，为57.0，与其他组织的表达量之间存在显著性差异（P<0.05），其他组织的表达量由高到低为脑（4.9）、眼（1.0）、肠道（0.5）、鳃（0.04），在皮肤、肌肉、心脏3个组织中未检测到scn1ab基因的表达信号（图2b）。scn4aa基因仅在肌肉组织中表达。scn4ab基因在所有检测的组织中均有表达，呈现广泛表达特征（图2c），在肝脏中表达量最高，为2 319.0，且与在其他组织表达量之间均存在显著性差异（P<0.05）。scn5aa基因在肝脏组织中表达量最高，为7.6（图2d），在鳃和脑中的表达量较低。scn5ab基因在肝脏、心脏、眼、脑4个组织中表达（图2e），其中在肝脏中表达量最高，为975.2，与在其他组织表达量之间存在显著性差异（P<0.05），在脑（1.0）中的表达量最低。scn8aa、scn8ab基因均在肝脏、脑、眼和鳃这4个组织中表达（图2f、g），在肝脏的相对表达量均为最高，均与在其他组织的表达量之间存在显著性差异（P<0.05）。

图2 暗纹东方鲀电压门控钠离子通道基因在各组织中实时定量表达

Fig.2 Real-time quantitative expression of Voltage-gated sodium channel in tissues of T.obscurus

li.肝脏；sk.皮肤；mu.肌肉；he.心脏；ey.眼；br.脑； in.肠道；gi.鳃。不同字母表示组间差异显著（P<0.05）。

li.Liver； sk.Skin； mu.Muscle； he.Heart； ey.Eye； br.Brain； in.Intestine； gi.Gill. Different letters indicate significant differences （P<0.05）.

2.3 各组织中电压门控钠离子通道α亚基的表达

依据各组织TTX含量的检测结果，弱毒性组包含脑、心脏两个组织，钠离子通道基因在脑组织中除scn4aa外，其余7种钠离子通道基因均有表达，表达量最高的为scn8ab基因，为396.5，其次为scn8aa（163.3）和scn1ab（145.0）基因，表达量最低的是scn5aa基因（1.0）（图3a）。心脏组织检测到scn1aa，scn4ab，scn5aa，scn5ab，scn8ab共5种钠离子通道基因的表达（图3b），表达量最高的是scn4ab基因（3 165.4），其次为scn5ab基因（1 384.4），表达量最低的是scn8aa基因（1.0）。

图3 电压门控钠离子通道基因在弱毒性组织中的表达

Fig.3 Expression of voltage-gated sodium channel genes in weakly toxic tissues

不同字母表示组间差异显著（P<0.05）。

Different letters indicate significant differences （P<0.05）.

微毒性组有肝脏、皮肤、肌肉、眼、肠道、鳃6种组织。皮肤组织仅发现scn4ab基因的表达。肝脏、眼组织均有除scn4aa基因外其余7种电压门控钠离子通道基因表达（图4a和4c）。肝脏组织表达量最高的是scn4ab基因（305.4），其次为scn5ab基因（62.3），表达量最低的是scn5aa基因（1.0）。眼组织表达量最高的是scn5aa基因（163.3），其次为scn4ab基因（27.7），表达量最低的是scn8ab基因（1.0）。肌肉组织发现2种钠离子通道基因表达，为scn4aa和scn4ab（图4b）。scn4ab基因表达高于scn4aa基因，两种基因的表达存在显著性差异（P<0.05）。肠道组织有scn1aa，scn1ab，scn4ab基因表达（图4d），表达量最高的是scn1ab基因（2.6），其次为scn4ab（1.0）和scn1aa（0.98）。scn1ab基因表达与scn1aa和scn4ab基因存在显著性差异。scn1aa和scn4aa基因表达之间不存在显著性差异。暗纹东方鲀鳃组织有scn1aa，scn1ab，scn4ab，scn5aa，scn8aa，scn8ab表达（图4e）。表达量最高的是scn4ab基因（125.2），其次为scn1aa基因（65.7），最低的是san8aa基因（1.0）。

图4 电压门控钠离子通道基因在微毒性组织中的表达

Fig.4 Expression of voltage-gated sodium channel genes in microtoxic tissues

不同字母表示组间差异显著（P<0.05）。

Different letters indicate significant differences （P<0.05）.

3 讨论

3.1 各组织TTX含量分析

TTX大多在河鲀鱼卵巢中的含量最高，其次为肝脏和皮肤，其余组织TTX含量较少。李春蕾^［

20］对2019年12月采自江苏的野生暗纹东方鲀、横纹东方鲀（Takifugu oblongus）、菊黄东方鲀（Takifugu flavidus）皮肤、肌肉、肝脏、卵巢组织TTX含量进行检测，数据显示暗纹东方鲀的肌肉、肝脏、卵巢，菊黄东方鲀肌肉、卵巢组织均可归为微毒性，暗纹东方鲀皮肤，菊黄东方鲀皮肤、肝脏组织为弱毒性，横纹东方鲀4个组织均为高毒性，暗纹东方鲀各组织毒素含量皮肤>肌肉>肝脏>卵巢。马廷龙等^{［参考文献 21

百度学术}21］2013年4月采自上海芦潮港的野生暗纹东方鲀组织TTX含量检测显示，肝脏组织为弱毒性，皮肤、肌肉、眼组织为微毒性。李世平等^{［参考文献 6

百度学术}6］于1998年对野生已性成熟暗纹东方鲀肌肉、肾脏、胃肠、卵巢、肝脏组织TTX含量检测数据显示，野生暗纹东方鲀的卵巢、肝脏、胃肠组织为高毒性，肾脏为微毒性，肌肉组织无毒。国内对养殖暗纹东方鲀不同年龄和季节各组织TTX含量测定数据显示，养殖的暗纹东方鲀几乎无毒^{［参考文献 6

百度学术}6， 22-24］，仅有一例检测出毒素的养殖样品^{［参考文献 25

百度学术}25］。野生暗纹东方鲀组织TTX含量分布不一致，这可能与其洄游特性、所处生长发育阶段和生存环境有关，陈永豪^{［参考文献 8

百度学术}8］对海水、湖水和潮感区采集的暗纹东方鲀幼鱼肝脏、皮肤、肌肉、胃与肠组织TTX含量进行分析，发现生活在海洋中的暗纹东方鲀虽小如葱头，但其肝脏就足以毒死小鼠。生活在潮感带中的暗纹东方鲀幼鱼个体间的组织毒性存在较大差异，肌肉含毒的差异大，整体为皮肤毒性大于肝脏，胃与肠无毒，湖产的均无毒。本研究采集的暗纹东方鲀约在250 g，各组织均为微毒和弱毒性，说明TTX能在暗纹东方鲀多个组织累积。检测得到的毒性强度介于野生和养殖之间，TTX含量最高的组织也不是普遍报道的“肝脏或皮肤”，推测毒性不高的原因是样本为1龄鱼，尚未开始洄游，生活的水环境中TTX源较少且未性成熟，TTX在组织内尚未开始大量累积；亦或是样本为养殖逃逸的暗纹东方鲀，其体内TTX处于初始累积阶段。

3.2 电压门控钠离子通道基因表达特征分析

脊椎动物拥有8条钠离子通道基因，含TTX物种对TTX抗性不能仅通过单一通道的进化来实现。因此东方鲀属鱼类电压门控钠离子通道基因序列的研究发现，每条电压门控钠离子通道基因存在一个或多个特定的突变，这些突变使得电压门控钠离子通道基因对TTX具有一定的抗性。scn4aa 、scn5aa、scn5ab基因结构域Ⅰ的401号位点发生F/Y 401 N/C的非芳香族氨基酸取代芳香族氨基酸，提供了约190～2 000倍的TTX抗性^［

26］；scn5ab基因结构域Ⅱ T 759 S/N位点突变使基因对TTX的抗性提高2 000倍^{［参考文献 27

百度学术}27］；scn1aa、scn4ab基因结构域Ⅲ M 1 240 T位点突变可以提供15倍抗性^{［参考文献 16

百度学术}16］；scn1aa、scn1ab、scn8aa基因结构域Ⅳ A 1529 G替换，提供1.5倍抗性^{［参考文献 28

百度学术}28］；scn4aa基因结构域DIV的 G 1533 T替代带来了约2倍的抗性^{［参考文献 25

百度学术}25］；scn8ab基因结构域Ⅳ在Ⅰ 1524 M的替换能产生5倍对TTX的抗性^{［参考文献 29

百度学术}29］，这些替换能提供2～2 000倍不等的TTX抗性，但在东方鲀属鱼类的同一物种中未能同时发现这些突变，每个物种中仅存在其中一个或多个突变，因此推测氨基酸突变提供的抗性是东方鲀属鱼类耐受TTX的原因之一，钠离子通道基因还可通过在组织高表达来提供TTX抗性。本研究发现8个组织均含TTX且能检测到1~8种电压门控钠离子通道基因表达。

电压门控钠离子通道基因在组织中分布具有特异性，能通过表达不同的α亚基来参与广泛的生理过程^［

11］。硬骨鱼类对于电压门控钠离子通道基因表达研究较为详尽的是斑马鱼，研究对象为胚胎和幼鱼^{［参考文献 30

百度学术}30］以及成鱼的心脏组织^{［参考文献 31

百度学术}31］，斑马鱼心脏组织8种电压门控钠离子通道基因均发现在一定程度上表达，scn5ab和scn4ab为表达的主要亚型，相对表达量最高的是scn5ab基因。斑马鱼胚胎和幼鱼的电压门控钠离子通道基因表达则显示，scn1aa和scn1ab基因都表达于神经系统；scn4aa在骨骼肌中表达，scn4ab基因在躯干体节中发现，两类钠离子通道基因的表达模式不重叠。scn5aa和scn5ab基因在神经和肌肉组织中发现表达；斑马鱼scn8aa和scn8ab基因表现出重叠的表达模式，scn8ab基因存在于表达scn8aa基因的细胞亚群中。

本研究中钠离子通道基因在暗纹东方鲀和斑马鱼种的表达模式存在差异。暗纹东方鲀心脏为弱毒性，有5种电压门控钠离子通道基因表达，scn4ab和scn5ab为主要的表达亚型，相对表达量最高的是scn4ab基因；而不含河鲀毒素的斑马鱼心脏组织相对表达量最高的是scn5ab基因，推测scn4ab基因在TTX调控下高表达来提高心脏组织对TTX的抗性。暗纹东方鲀肝脏组织除未发现scn4aa基因表达外,其余7种电压门控钠离子通道基因均显著高表达，这可能是在为后续肝脏组织累积高浓度的TTX做准备。皮肤组织仅发现scn4ab基因表达，推测scn4ab基因是皮肤组织抵抗TTX的关键基因。

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