缢蛏C型凝集素基因ScCTL-2的序列分析及凝菌活性
CSTR:
作者:
作者单位:

上海海洋大学,上海海洋大学,上海海洋大学,上海海洋大学,上海海洋大学

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中图分类号:

S197

基金项目:

国家高技术研究发展计划(2012AA10A400-3);国家自然科学基金(31472278);上海知识服务平台(ZF1206)


Sequence analysis and bacterial agglutination of C-type lectin gene ScCTL-2 in Sinonovacula constricta
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shanghai ocean university,shanghai ocean university,shanghai ocean university,shanghai ocean university,shanghai ocean university

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    摘要:

    为研究缢蛏C型凝集素基因ScCTL-2的结构和功能特点,克隆了该基因的全长序列,并对其mRNA的表达模式以及重组蛋白的凝菌活性进行研究。结果显示,ScCTL-2的cDNA全长2 194 bp,共编码630个氨基酸,其氨基酸序列拥有4个C型凝集素糖识别结构域和1个N端跨膜区,这一特殊的序列结构不同于任何一种已知的C型凝集素。基因mRNA在健康缢蛏肝胰腺中的表达量显著高于其他组织,在鳃中的表达量次之,而在其余组织中的表达量没有显著性差异;金黄色葡萄球菌与鳗弧菌感染能够显著上调ScCTL-2在缢蛏血细胞中的表达。ScCTL-2的重组蛋白凝菌实验显示:在Ca2+存在的情况下,rScCTL-2能够对实验所采用的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、藤黄微球菌和酿酒酵母均产生明显的凝集反应;当溶液中不存在Ca2+时,凝集反应几乎不能发生,意味着rScCTL-2的凝菌活性是严格Ca2+依赖的。研究表明,ScCTL-2可能是一种新的无脊椎动物C型凝集素类型,它具有无脊椎动物C型凝集素普遍具备的免疫活性,可能在缢蛏的免疫中具有重要作用。

    Abstract:

    C-type lectins are a superfamily of Ca2+-dependent carbohydrate-binding proteins that play crucial roles in invertebrate immunity. A novel C-type lectin gene (ScCTL-2) was identified in razor clam Sinonovacula constricta. Sequence analysis showed that the full length ScCTL-2 contains a 1893 bp ORF encoding 630 amino acid polypeptide with four CTLD (C-type lectin domain) and a N-terminal transmembrane region. The special structure of ScCTL-2 protein revealed that ScCTL-2 is perhaps a new group of invertebrate C-type lectins. The ScCTL-2 was expressed in almost all tissues, with highest expression in hepatopancreas and the second highest expression in gill. Bacterial stimulation up-regulated ScCTL-2 expression in hemocytes. The spatial-and temporal-specific expression patterns of ScCTL-2 suggest it may be an immune-related gene in razor clam. Recombinant protein (rScCTL-2) displayed a broad bacterial agglutination spectrum, and the agglutinate activity was strictly Ca2+-dependent. It could agglutinate all the experimental bacteria only if Ca2+ existed. The results suggest ScCTL-2 is a novel gene possessing common immune characteristics of invertebrate C-type lectins.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

蓝天一,牛东红,刘晓军,彭茂潇,李家乐.缢蛏C型凝集素基因ScCTL-2的序列分析及凝菌活性[J].上海海洋大学学报,2019,28(1):20-28.
LAN Tianyi, NIU Donghong, LIU Xiaojun, PENG Maoxiao, LI Jiale. Sequence analysis and bacterial agglutination of C-type lectin gene ScCTL-2 in Sinonovacula constricta[J]. Journal of Shanghai Ocean University,2019,28(1):20-28.

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  • 收稿日期:2018-04-15
  • 最后修改日期:2018-05-15
  • 录用日期:2018-08-03
  • 在线发布日期: 2019-01-21
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