新加坡石斑鱼虹彩病毒ORF086蛋白的原核表达、纯化及抗体制备

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新加坡石斑鱼虹彩病毒ORF086蛋白的原核表达、纯化及抗体制备
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                        [cstr]
                    
作者:
                        
                        
                    
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中图分类号:S941
基金项目:广东省自然科学基金(06104920)

Prokaryotic expression,purification and antibody preparation of SGIV ORF086 protein

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新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)是导致石斑鱼养殖严重经济损失的主要病原体。本研究构建了含有新加坡石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)ORF086基因的重组表达质粒载体pET32a-ORF086,将其转化到大肠杆菌中进行融合表达,经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,证实重组大肠杆菌融合表达了SGIV ORF086蛋白。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isoprophl-thio-β-D-galactopyranoside,IPTG)浓度、诱导温度、诱导时间等诱导表达条件的优化,确定在0.7 mmol/L IPTG、16℃诱导14 h时可溶性SGIV ORF086重组蛋白占重组蛋白的60%。经镍琼脂糖凝胶柱纯化重组蛋白,纯化度达95%以上。用纯化的SGIV ORF086蛋白免疫小鼠,获得了高效特异的SGIV ORF086抗血清。

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夏立群,张红莲,梁海鹰,刘森林.新加坡石斑鱼虹彩病毒ORF086蛋白的原核表达、纯化及抗体制备[J].上海海洋大学学报,2010,(1).
XIA Li-qun, ZHANG Hong-lian, LIANG Hai-ying, LIU Sen-lin (. College of Ocean & Technology, Guangdong Ocean University, Zhanjiang, China,. School of life Science, Sun Yat-sen University, Guangzhou . Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology, Epidemiology for Aquatic Economic Animals, Zhanjiang, China). Prokaryotic expression, purification and antibody preparation of SGIV ORF086 protein[J]. Journal of Shanghai Ocean University,2010,(1).

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