大口黑鲈肝细胞原代培养方法的建立

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大口黑鲈肝细胞原代培养方法的建立
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                        [cstr]
                    
作者:
                        
                        
                    
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中图分类号:S965.211
基金项目:国家自然科学基金;上海市教委资助项目;上海市重点学科建设项目

Study on primary culture of hepatocytes from Micropterus salmoides

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取材大口黑鲈肝脏组织,培养其原代细胞,比较研究了组织块法和酶消化法两种培养方法及不同的培养条件,以确定其最佳培养方法和条件,同时观察了长期培养过程中肝细胞的形态变化。结果表明:组织块方法不适于大口黑鲈肝细胞的培养,未见细胞从组织块中迁出。而胰蛋白酶消化法获得良好稳定的培养效果。胰蛋白酶浓度0.25%,消化时间20 min,分步收集肝细胞,经台盼蓝检测和血球计数板计数,平均活力>90%,每克肝重可获得3×106个分离肝细胞。在细胞活力和数量两方面达到最佳平衡。在含20%胎牛血清、10μg/mL胰岛素的M199/L15培养基中,于4%CO2,28℃培养箱中长期培养并传代。

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喻文娟,杨先乐,唐俊,郑宗林,张宁.大口黑鲈肝细胞原代培养方法的建立[J].上海海洋大学学报,2006,(4):430-435.
YU Wen-juan, YANG Xian-le, TANG Jun, ZHENG Zong-lin, ZHANG Ning. Study on primary culture of hepatocytes from Micropterus salmoides[J]. Journal of Shanghai Ocean University,2006,(4):430-435.

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收稿日期:2005-12-20
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